I.
TUJUAN
1. Untuk mengetahui cara
pemeriksaan glukosa darah, kolesterol, protein total dan asam urat.
2. Untuk mengetahui kadar
glukosa darah, kolesterol, protein total dan asam urat dalam tubuh.
II.
DASAR TEORI
a.
Glukosa Darah
Glukosa, suatu gula monosakarida, adalah salah
satu karbohidrat terpenting
yang digunakan sebagai sumber tenaga bagi hewan dan tumbuhan. Glukosa
merupakan salah satu hasil utama fotosintesis dan awal bagi respirasi. Bentuk alami
(D-glukosa) disebut juga dekstrosa,
terutama pada industri pangan.
Glukosa (C6H12O6, berat molekul 180.18) adalah
heksosa—monosakarida
yang mengandung enam atom karbon. Glukosa merupakan aldehida (mengandung
gugus -CHO). Lima karbon dan satu oksigennya membentuk
cincin yang disebut "cincin piranosa", bentuk paling stabil untuk aldosa berkabon enam.
Dalam cincin ini, tiap karbon terikat pada gugus samping hidroksil dan hidrogen
kecuali atom kelimanya, yang terikat pada atom karbon keenam di luar cincin,
membentuk suatu gugus CH2OH. Struktur cincin ini berada dalam
kesetimbangan dengan bentuk yang lebih reaktif, yang proporsinya 0.0026% pada pH 7.
Glukosa diserap ke dalam peredaran darah
melalui saluran pencernaan. Sebagian
glukosa ini kemudian langsung menjadi bahan bakar sel otak,
sedangkan yang lainnya menuju hati dan otot, yang
menyimpannya sebagai glikogen
("pati hewan") dan sel lemak,
yang menyimpannya sebagai lemak.
Glikogen merupakan sumber energi cadangan yang akan dikonversi kembali menjadi
glukosa pada saat dibutuhkan lebih banyak energi. Meskipun lemak simpanan dapat
juga menjadi sumber energi cadangan, lemak tak pernah secara langsung
dikonversi menjadi glukosa. Fruktosa
dan galaktosa,
gula lain yang dihasilkan dari pemecahan karbohidrat, langsung diangkut ke
hati, yang mengkonversinya menjadi glukosa.
Adapun peranan glukosa dalam darah adalah sebagai
berikut:
·
Sebagai pusat semua metabolisme
·
Bahan bakar universal untuk sel
manusia
·
Sumber karbon untuk sintesis banyak
senyawa lain
·
Untuk energi semua tipe sel manusia
b. Kolesterol
Kolesterol adalah senyawa lemak kompleks, yang 80%
dihasilkan dari dalam tubuh (organ hati) dan 20% sisanya dari luar tubuh (zat
makanan) untuk bermacam-macam fungsi di dalam tubuh, antara lain membentuk
dinding sel. Nilai rujukan untuk kadar kolesterol total adalah 140-250 mg/dl.
Kolesterol yang berada dalam zat makanan yang kita
makan dapat meningkatkan kadar kolesterol dalam darah. Tetapi, sejauh pemasukan
ini seimbang dengan kebutuhan, tubuh kita akan tetap sehat.
Kolesterol tidak larut dalam cairan darah, untuk itu
agar dapat dikirim ke seluruh tubuh perlu dikemas bersama protein menjadi partikel
yang disebut Lipoprotein, yang dapat dianggap sebagai ‘pembawa’ (carier)
kolesterol dalam darah.
Di dalam tubuh kita, kolesterol terdiri dari
kolesterol LDL ( low density lipoprotein), HDL ( hight density lipoprotein),
dan trigliserida. Kolesterol LDL yang di produksi di hati beredar di pembuluh
darah dan menuju ke sel-sel tubuh, seperti sel jantung, sel otak, dan sel sel
di organ lain yang membutuhkan. Kolesterol LDL yang tersisa akan dibawa oleh
kolesterol HDL kembali ke hati dan dibuang ke kandung empedu sebagai asam
empedu.
LDL (Low Density Lipoprotein) merupakan kolesterol
yang bersifat jahat, karena dia menyebabkan kolesterol yang semula bebas di aliran
darah menjadi menempel di dinding pembuluh darah. Akibatnya, pembuluh darah
menjadi menyempit dan kaku. Proses inilah yang mendasari risiko terjadinya
penyakit jantung, tekanan darah tinggi, stroke, gangguan aliran darah ke bagian
organ lain (termasuk saraf tepi) dan sebagainya.
Molekul LDL dapat melekat di dinding pembuluh darah
karena adanya proses oksidasi oleh radikal bebas ( misalnya asap rokok). LDL
yang teroksidasi tersebut mampu mengubah sel-sel makrofag (sejenis sel darah
putih yang beredar di dalam darah) menjadi sel busa ( foam cell ) sehingga akan
membentuk gumpalan ( plaque) yang makin lama semakin membesar, dan hasil
akhirnya berupa penyempitan pembuluh darah.
LDL yang teroksidasi tadi juga akan meransang sel-sel
otot polos di dinding pembuluh darah ( pembuluh darah memiliki otot pada
dindingnya sehingga dapat bersifat fleksibel, dapat mengembang dan mengkerut)
dan akhirnya dapat menyebabkan pengerasan dinding pembuluh darah, tidak dapat
bersifat fleksibel lagi, dan tekanan darah dapat meningkat karena aliran darah
tidak lancar. Pembuluh darah yang mengeras juga mudah pecah jika tekanan darah
meningkat tajam.
Sedangkan HDL (High Density Lipoprotein), merupakan kolesterol
yang bersifat baik yang akan membuang kolesterol yang sudah tidak terpakai oleh
tubuh termasuk yang menempel di dinding pembuluh darah ke organ ekskresi untuk
selanjutnya dibuang dari tubuh.
Golongan lemak yang menurunkan kadar LDL dan menaikkan
kadar HDL disebut monosaturated dan polisaturated fat . Contoh produknya,
antara lain: corn oil, soy bean, cottonseed oil, canola oil, olive oil, fish,
peanut, almond, avocado dan sebagainya.
Golongan lemak yang “menaikkan jumlah LDL dan HDL
dengan kekuatan seimbang” disebut saturated fat. Contoh produknya antara lain whole milk, butter, cheese, ice cream, red
meat, coconut, coconut milk, dan coconut oil.
Golongan lemak yang “menaikkan jumlah LDL” dan
“menurunkan jumlah HDL” disebut Transaturated fat. Contoh produknya adalah sebagian
besar vegetable oil, dan fast food.
c. Protein
Total
Protein adalah senyawa organik yang besar yang
mengandung atom karbon, nitrogen, oksigen, hidrogen, dan beeberapa diantaranya
mengandung sulfur, phospor, besi atau mineral lain. Protein disusun darri 23
atau lebih unit sederhana yang disebut asam amino, artinya protein tersebut
mengandung gugus asam atau karboksil (-COOH) dan gugus amino (-NH2) yang
bersifat basa sehingga menyebabkan protein bersifat amfoter, yaitu mempu
bersifat dan bereaksi. Dengan demikian, protein mempunyai mekanisme untuk
mencegah pembentukan pH yang tiba-tiba dalam tubuh.
Selain itu menurut Dyah (2002), protein adalah senyawa
organik yang berat molekulnya tinggi, mengandung unsur-unsur C, H, O dan N,
serta beberapa protein mengandung sulfur dan phospor.
Jenis-jenis protein adalah protein nabati yaitu
protein yanng berasal dari tumbuhan, dimana jenis protein ini banyak dan sangat
bervariasidalam bentuk sajian makanan sehat yang kaya akan protein seperti
tahu, tempe dan lain-lain. Jenis protein yang lain adalah protein hewani yaitu
protein yang berasal dari hewan yang salah satunya terdapat pada daging, telur
dan kerupuk susu (Widowati, 2002).
Manfaat protein dalam tubuh, antara lain:
1.
Membentuk jaringan baru dalam masa
pertumbuhan dan perkembangan tubuh
2.
Memelihara jaringan tubuh,
memperbaiki serta mengganti jaringan yang rusak atau mati.
3.
Mengatur keseimbangan air yang
terdapat dalam tiga kompartemen, yaitu intraseluler, ekstraseluler, dan
intravasikuler.
4.
Mempertahankan kenetralan atau asam
basa tubuh.
5.
Membuat air susu, enzim dan hormon.
6.
Menyediakan energi yang diperlukan
untuk aktivitas tubuh, terutama dalam keadaan memaksa misalnya kelaparan.
Pemeriksaan kadar protein total dapat dilakukan dengan
menggunakan metode Biuret. prinsip metode ini adalah protein dalam serum akan
bereksi dengan alkalis copper-tartrat dan memberikan warna ungu (violet). Warna
yang terbentuk ini kemudian diukur absorbancenya dengan spektrofotometer pada l 530-570 nm (550).
d. Asam Urat
Asam urat adalah asam hasil
metabolisme protein berupa asam-asam inti yang terdapat dalam inti sel. Setelah
mengalami berbagai miam proses biokimia akan menjadi oksida purin. Purin
sendiri merupakan salah satu turunan asam ammo. Oksidasi purin ini di
metabolisme lagi oleh suatu enzim dan menghaSilkan produk akhir yaitu asam
urat. Jadi asam Urat adalah hasil akhir dari metabolisme tubuh dari bahan purin.
Jadi asam urat merupakan hasil
metabolisme di dalam tubuh, yang kadarnya tidak boleh berlebih. Setiap orang
memiliki asam urat di dalam tubuh, karena pada setiap metabolisme normal
dihasilkan asam urat. Sedangkan pemicunya adalah makanan dan senyawa lain yang
banyak mengandung purin. Sebetulnya, tubuh menyediakan 85 persen senyawa purin
untuk kebutuhan setiap hari. Ini berarti bahwa kebutuhan purin dari makanan
hanya sekitar 15 persen.
Asam urat menjadi masalah bila ekresi atau proses
pembuangan tidak terjadi dengan baik. Hal ini terjadi karena ginjal mengalami
gangguan fungsi. Ginjal tidak rusak tapi kemampuannya membuang asam urat
kurang. Hal ini biasanya karena faktor keturunan. Oleh sebab itu bila ada
gangguan fungsi ginjal, kadar asam urat dalam darah akan meningkat atau disebut
sebagai hiperurisemia. Selain dibuang lewat ginjal (70%) dalam bentuk urin,
asam urat yang berasal dari makanan dan metabolisme tubuh ini dikeluarkan juga
melalui usus yaitu 30%.
Kadar asam urat darah yang dianggap normal rata-rata
5-7 mg% (6,5 mg% batas tinggi pria dan 5,5 mg% pada wanita). Sekitar 50% asam
urat dalam tubuh berasal dari asupan makanan. peningkatan kadar asam urat dalam
darah ini bisa juga terjadi karena asupan makanan yang mengandung purin yang
berlebihan. Bahan makanan yang mengandung purin yang tinggi sehingga dapat
meningkatkan kadar asam urat dalam darah antara lain daging, hati, ikan,
sayuran, seperti kangkung, kacang-kacangan serta minuman seperi kopi dan
alcohol.
Pemeriksaan
asam urat di laboratorium dilakukan dengan dua cara, Enzimatik dan Teknik
Biasa. Kadar asam urat normal menurut tes Enzimatik maksimum 7 mg/dl. Sedangkan
pada Teknik Biasa, nilai normalnya maksimum 8 mg/dl. Bila hasil pemeriksaan
menunjukkan kadar asam urat melampaui standar normal itu, penderita
dimungkinkan mengalami hiperurisemia.
Kadar
asam urat normal pada pria dan perempuan berbeda. Kadar asam urat normal pada
pria berkisar 3,5 – 7 mg/dl dan pada perempuan 2,6 – 6 mg/dl. Kadar asam urat
diatas normal disebut hiperurisemia. Perjalanan penyakit yang klasik biasanya
dimulai dengan suatu serangan atau seseorang memiliki riwayat pernah cek asam
uratnya tinggi di atas 7 mg/dl, dan makin lama makin tinggi.
Jika
demikian, kemungkinannya untuk menjadi penyakit gout itu makin besar. Biasanya
25% orang yang asam uratnya tinggi akan menjadi penyakit gout. Bila kadar asam
urat tinggi tapi tidak ada gejala serangan sendi ini disebut stadium awal. Pada
setiap orang berbeda-beda. Ada yang bertahun-tahun sama sekali tidak muncul
gejalanya, tetapi ada yang muncul gejalanya di usia 20 tahun, 30 tahun, atau 40
tahun. Faktor risiko yang menyebabkan orang terserang penyakit asam urat adalah
pola makan, kegemukan, dan suku bangsa.
Di
dunia, suku bangsa yang paling tinggi prevalensinya pada orang Maori di
Australia. Prevalensi orang Maori terserang penyakit asam urat tinggi sekali,
sedangkan di Indonesia prevalensi tertinggi pada penduduk pantai dan yang
paling tinggi di daerah Manado-Minahasa karena kebiasaan atau pola makan ikan
dan mengonsumsi alkohol.
Alkohol
menyebabkan pembuangan asam urat lewat urine itu ikut berkurang sehingga asam
uratnya tetap bertahan di dalam darah. Konsumsi ikan laut yang tinggi juga
mengakibatkan asam urat.
Asupan
yang masuk ke tubuh juga memengaruhi kadar asam urat dalam darah. Makanan yang
mengandung zat purin yang tinggi akan diubah menjadi asam urat. Purin yang
tinggi terutama terdapat dalam jeroan, sea food: udang, cumi, kerang, kepiting,
ikan teri.
III. ALAT DAN BAHAN
a. Alat
1. Spoit 3-5 ml
2. Torniqued/Pengikat Karet
Lengan
3. Sentrifius (Centrifuge)
4. Tabung Sentrifius
5. Photo Analyzer
6. Mikro Pipet 10 µl, 1000 µl
7. Kuvet
8. Rak Tabung
b. Bahan
1. Alkohol 70%
2. Kapas
3. Aquades
4. Reagen pemeriksaan glukosa
(Glucose)
5. Larutan standard untuk
glukosa
6. Reagen pemeriksaan kolesterol
(Cholesterol)
7. Larutan standard untuk
kolesterol
8. Reagen pemeriksaan protein
9. Laruten standard untuk
protein
10. Reagen pemeriksaan asam urat
(Uric Acid)
11. Larutan standard untuk asam
urat
IV. CARA KERJA
1.
Siapkan alat-alat yang dibutuhkan.
2.
Jika darah diambil pada bagian vena fossa cubiti, pasang
torniqued (ikatan pembendung) pada lengan bagian atas dan mintalah pada orang
yang diambil darahnya untuk mengepal dan membuka tangannya beberapa kali agar
vena jelas terlihat.
3.
Tegakkanlah kulit di bagian lengan dengan jari-jari tangan
kiri supaya vena tidak bergerak-gerak pada saat tusukan.
4.
Bersihkan bagian yang akan diambil darah dengan alkohol 70%.
5.
Tusuklah bagian vena yang sudah dibersihkan dengan spoit
sampai ujung jarum masuk ke dalam lumen vena. Tarik penghisap spoit
perlahan-lahan sampai jumlah darah yang dikehendaki didapat.
6.
Lepaskan karet bendungan.
7.
Taruhlah kapas diatas jarum dan cabutlah spoit.
8.
Bukalah jarum spoit dan alirkan perlahan-lahan dalam tabung
sentrifius secukupnya (± 3 ml) untuk dipisahkan serumnya, diamkan 5-10 menit
sebelum disentrifius
9.
Masukkan ke dalam sentrifius dengan kecepatan 3.500 rpm
selama 5 menit.
10. Jika fibrin belum terpisah,
masukkan kembali ke dalam sentrifius selama 5 menit. Jika sampel darah telah
terpisah antara plasma, fibrin dan serum maka sampel tersebut telah siap untuk
digunakan dalam uji selanjutnya.
11. Sediakan 3 buah tabung untuk
tiap-tiap pemeriksaan, lalu isi semua tabung dengan reagen masing-masing menggunakan
mikrokuvet sebanyak 1000 µl.
12. Tabung I (BLANKO) untuk
tiap-tiap pemeriksaan hanya berisi reagen masing-masing. Tabung II (STANDAR) diisi
dengan larutan standar, yaitu asam urat 10 µl, glukosa 10 µl, kolesterol 20 µl,
dan protein 20 µl. Sedangkan tabung III (SERUM) diisi dengan serum, yaitu asam
urat 10 µl, glukosa 10 µl, kolesterol 20 µl, dan protein 20 µl. Goyangkan
tabung agar larutan tercampur dengan baik.
13. Untuk pemeriksaan asam urat,
tabung didiamkan selama 30 menit, glukosa darah 10 menit, kolesterol 10 menit,
dan protein 10 menit.
14. Setelah didiamkan,
masing-masing sampel akan diuji kadarnya dengan menggunakan Photo Analyzer
(Cara pengoperasian alat pada Lampiran).
15. Catat hasil uji yang keluar
lalu masukkan ke dalam rumus.
V.
HASIL PEMERIKSAAN PHOTO
ANALYZER
a. Glukosa Darah
FACTOR (Blanko) =
458
C1 (Standar) = 281
PAT. (Serum) = 171
b. Kolesterol
FACTOR (Blanko) =
824
C1 (Standar) = 408
PAT. (Serum) = 224
c. Protein
FACTOR (Blanko) =
24
C1 (Standar) = 10,3
PAT. (Serum) = 11,2
d. Asam Urat
FACTOR (Blanko) =
75
C1 (Standar) = 3,51
PAT. (Serum) = 1,58
VII.
PEMBAHASAN
Berdasarkan pengujian dan perhitungan
yang telah dilakukan diperoleh nilai sebagai berikut:
·
Glukosa : 104,9 mg/dl
·
Kolesterol : 110,9 mg/dl
·
Protein : 4,8 mg/dl
·
Asam Urat : mg/dl
Kadar glukosa sampel (104,9 mg/dl)
merupakan kadar yang normal setelah dibandingkan dengan nilai rujukan. Kadar
kolesterol (110,9 mg/dl) tergolong rendah, sebab nilai rujukan untuk kolesterol
normal adalah 140-250 mg/dl. Demikian juga dengan kadar protein total (4,8
mg/dl) tergolong rendah dengan nilai rujukan normal sebesar 6-8 mg/dl.
VIII. KESIMPULAN
Dari pemeriksaan yang dilakukan dapat
ditarik kesimpulan bahwa metode pemeriksaan asam urat, glukosa, kolesterol dan
protein total dapat dilakukan dalam sekali pengambilan spesimen/sampel darah.
Hasil pemeriksaan pun harus dibandingkan dengan nilai rujukan, sehingga dapat
diketahui tingkatan kadar asam urat, glukosa, kolesterol dan protein total
seseorang itu rendah, normal atau tinggi. Dengan demikian dapat digunakan
sebagai landasan dalam diet sehari-hari.